大腸桿菌蛋白表達系統是目前應用最廣泛,也是最經濟實惠的蛋白表達系統。E.coli遺傳背景清楚、表達系統完善、操作方便、增殖快、成本低、表達量高、穩定性好,適用于多種屬蛋白的表達,尤其對小分子蛋白的生產具有極大的優勢,但原核表達易形成不可溶的包涵體。德泰生物擁有超十年的蛋白表達經驗,豐富的包涵體復性經驗,可提供從密碼子優化到重組蛋白表達純化的一站式服務。
經驗豐富
原核表達蛋白3000+
豐富的包涵體復性經驗
高成功率
成功率>95%
多種套餐不成功不收費
自主研發
上清表達優化
提高蛋白可溶性表達
一站式服務
從密碼子優化到
原核蛋白表達純化
序列分析&密碼子優化
1天
客戶提供目的蛋白序列,德泰對稀有密碼子、密碼子偏好性等因素進行分析優化
基因合成&載體構建
1周
對合成的基因進行測序驗證,克隆至德泰專有的高效表達載體中
表達小試&可溶性分析
1周
選擇不同菌株進行多種表達條件優化,提高蛋白可溶性表達
放大表達&純化
1-2周
選擇合適的純化方法,結合先進的AKTA純化設備來純化蛋白
交付:3-5mg蛋白;蛋白質檢報告;表達載體1μg;基因測序報告;項目流程報告
案例1:在大腸桿菌中無標簽蛋白的表達純化
①全菌破菌離心后上清電泳檢測結果
Lane M:Protein marker
Lane 1~2:全菌破菌離心后上清
②初步純化后蛋白電泳檢測結果
Lane M:Protein marker
Lane 1:過疏水柱后的蛋白
③二次純化后蛋白電泳檢測結果
Lane M:Protein marker
Lane 1~10:Sephracyl純化的蛋白
案例2:包涵體復性純化
①復性后初次親和層析純化結果
Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: 包涵體溶解后上清
Lane 2:上清同Ni-IDA孵育后流出液
Lane 3-6: 50 mM Imidazole的洗脫組分
Lane 7-12: 500 mM Imidazole的洗脫組分
②二次離子交換層析純化結果
Lane M: SDS-PAGE Protein Marker
Lane 1: Ni-IDA純化后的洗脫液
Lane 2: 同SP Beads 6FF柱孵育后流出液
Lane 3-4: 50 mM NaCl的洗脫組分
Lane 5-8: 500 mM NaCl的洗脫組分